30立方米空氣調節(jié)器除病毒試驗艙試驗步驟（一）

30立方米空氣調節(jié)器除病毒試驗艙有兩種評價空氣調節(jié)器除病毒的試驗方法，分別為物體表面上的病毒殺滅測試和氣溶膠中的病毒去除測試，前者適用于采用化學因子和其他因子消毒的空氣調節(jié)器，后者適用于采用物理因子、化學因子和其他因子消毒的空氣調節(jié)器。

30立方米空氣調節(jié)器除病毒試驗艙物體表面上的病毒殺滅測試：
1、適用的病毒種類
根據(jù)試驗安全風險，物體表面上的病毒殺滅測試主要針對手足口病毒、甲型流感病毒、冠狀病毒以及其他低致病性或非致病性病毒。

2、試驗樣塊的制備
用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其經(jīng)紗為(21+2)支數(shù)，緯紗為(21+2)支數(shù)，經(jīng)過脫漿預處理制成的50 mm*50 mm的方巾。試驗前，所有試驗樣塊應在121 C條件下滅菌20 min,烘干后備用。

3、試驗步驟
a)試驗第一天，將試驗用細胞接種到96孔細胞培養(yǎng)板，待細胞生長匯合至單層時備用;
b)將滅菌干燥后的試驗樣塊置于無菌培養(yǎng)皿中,用移液槍吸取0.5mL病毒液逐滴均勻地滴加在試驗樣塊表面，室溫條件下待表面微干即可使用;
c)將試驗樣機放置于30m'試驗艙中,分體掛壁式空氣調節(jié)器放置在艙體的--側，下沿離地1.8m，分體落地式空氣調節(jié)器按照正常安裝方向放置于試驗艙地面中心位置，吊頂式空調按照正常安裝方向放置于試驗艙地面中心位置。將制備好的試驗樣塊固定于試驗樣機出風口正中央直線距離1.5 m處；
d)調節(jié)艙體環(huán)境，滿足試驗環(huán)境要求后，運行樣機，作用最長不超過360 min。作用結束后將對照組與試驗組布片分別轉移至50 mL離心管中，加入4.5 mL無血清DMEM培養(yǎng)基，反復吹打釋放病毒，同時取0.5 mL病毒液加入4.5 mL無血清DMEM培養(yǎng)基，吹打混勻作為陽性對照；
e)取上述對照組、試驗組、陽性對照各1 mL病毒液上清，離心(3000g, 5min) ，將上清轉移至新的EP管，并用無血清DMEM培養(yǎng)基10倍梯度稀釋；
f)將50 μL的病毒稀釋液加入生長至步驟a)的單層細胞，每個稀釋度設置4孔重復；
g)置于37℃、5%CO2孵育2小時，棄去上清液，加入含雙抗和1 μg/mL TPCK胰酶的無血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)4-5天；
h)每天觀察細胞生長狀況，記錄病變情況。根據(jù)Reed-Muench公式計算半數(shù)組織感染量TCID50；
i)試驗重復三次， 根據(jù)試驗組和對照組的平均病毒滴度對數(shù)值/滴度，計算病毒殺滅對數(shù)值/殺滅率。

30立方米空氣調節(jié)器除病毒試驗艙物體表面上的病毒殺滅測試到此結束。